以下药物不能与利益平等使用。
氨基水杨酸钠 氨基水杨酸钠可使利福平的游离血浓度升高，因而使利福平代谢加速。另外，还有人认为氨基水杨酸钠可妨碍利福平的吸收，故二者不宜同服。
苯巴比妥 两者都是肝药物代谢酶诱导剂，可以相互促进代谢，降低疗效。
丙磺舒 丙磺舒能与利福平在肝脏中竞争肝受体，减缓利福平在体内的新陈代谢。
喹诺酮类 利福平可以消除萘啶酸和氟哌酸的作用，降低氟嗪酸和环丙沙星的抗菌效率，因此不应与喹诺酮类抗菌素一起使用。
环孢霉素 利福平可环孢霉素在体内代谢加快，降低环孢霉素的功效。
稳定，美沙酮，美西律 利福平可使稳定，美沙酮，美西律在体内的代谢加速而影响这些药物的疗效。利福平可使美沙酮的镇痛作用降低。
雌激素，口服避孕药 利福平可加速雌激素，口服避孕药的代谢，使雌激素，口服避孕药在细胞中水解速率加大到3倍，导致病人出现无月经、月经延长、出血和避孕失败的现象。
氨硫脲、皮质激素、普萘洛尔、甲苯磺丁脲、口服抗凝剂 利福平可以加速肝脏药物代谢酶代谢的药物的代谢，降低药物的疗效。
